腫瘤免疫ppt課件

1、第15章 腫瘤免疫,腫瘤免疫學(xué)( tumor immunology)是研究腫瘤抗原性質(zhì)、機(jī)體對(duì)腫瘤的免疫應(yīng)答、機(jī)體免疫功能與腫瘤發(fā)生、發(fā)展的相互關(guān)系以及腫瘤免疫學(xué)診斷和免疫學(xué)防治的科學(xué)。,,第一節(jié) 腫瘤抗原,腫瘤抗原（tumor antigen）是指在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中新出現(xiàn)的或過度表達(dá)的抗原物質(zhì)。,機(jī)體產(chǎn)生腫瘤抗原的可能機(jī)制為：① 基因突變；② 細(xì)胞癌變過程使原本不表達(dá)的某些基因被激活；③ 抗原合成過程的某些環(huán)節(jié)發(fā)生

2、異常，如糖基化異常；④ 胚胎時(shí)期抗原或分化抗原的異常、異位表達(dá)；⑤ 某些基因產(chǎn)物尤其是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的過度表達(dá)；⑥ 外源性基因（如病毒基因）的表達(dá)。,1．腫瘤特異性抗原（tumor specific antigen, TSA） 是腫瘤細(xì)胞所特有的新抗原，它只表達(dá)于腫瘤細(xì)胞，而不存在于正常組織細(xì)胞。,2．腫瘤相關(guān)性抗原 ( tumor associated antigen, TAA) 是指非腫瘤細(xì)胞所特有的，正常組織或細(xì)胞也

3、可表達(dá)的抗原物質(zhì)，但此類抗原在癌變細(xì)胞的表達(dá)水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過正常細(xì)胞。,一、根據(jù)腫瘤抗原的特異性分類,1．理化因素誘發(fā)的腫瘤抗原2．病毒誘生的腫瘤抗原3．自發(fā)性腫瘤抗原4．正常細(xì)胞成分的異常表達(dá) ⑴ 分化抗原： ⑵ 過度表達(dá)的抗原： ⑶ 胚胎抗原： ⑷ 細(xì)胞突變產(chǎn)生的獨(dú)特型抗原：,二、根據(jù)腫瘤抗原產(chǎn)生機(jī)制分類,病毒誘生的腫瘤抗原,,第二節(jié) 機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)機(jī)制,機(jī)體抗腫瘤的免疫學(xué)效應(yīng)十分復(fù)雜，涉及特異性和非特異

4、性抗腫瘤機(jī)制相互交錯(cuò)，體液免疫與細(xì)胞免疫機(jī)制相互協(xié)調(diào)和補(bǔ)充，從而共同執(zhí)行免疫監(jiān)視功能。,㈠ T細(xì)胞 1. CD4+T細(xì)胞 2. CD8+T細(xì)胞(在抗腫瘤效應(yīng)中起關(guān)鍵作用) 3. γδ+ T細(xì)胞 ㈡ NK細(xì)胞 ㈢ 巨噬細(xì)胞,一、抗腫瘤的細(xì)胞免疫機(jī)制,1．補(bǔ)體的溶細(xì)胞效應(yīng) 2．抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒效應(yīng) 3．抗體的免疫調(diào)理作用 4．抗體封閉腫瘤細(xì)胞表面某些受體 5．抗體干擾腫瘤

5、細(xì)胞粘附作用 6．其他機(jī)制,二、抗腫瘤的體液免疫機(jī)制,,第二節(jié) 腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn),腫瘤免疫學(xué)檢驗(yàn)是指用免疫學(xué)的方法檢測(cè)腫瘤抗原、抗體等腫瘤標(biāo)志物和腫瘤患者的免疫功能狀態(tài)，為腫瘤的診斷、觀察病情、評(píng)價(jià)療效及預(yù)后具有重要價(jià)值。,近年來隨著現(xiàn)代科技的不斷發(fā)展，免疫學(xué)，分子生物學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)，生物化學(xué)的深入研究，發(fā)現(xiàn)了許多特異性較強(qiáng)，有一定臨床價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物100多種，受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的高度重視。,一、腫瘤標(biāo)志物,腫瘤標(biāo)志物（tumor m

6、arker，TM）是指在腫瘤的發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細(xì)胞本身所產(chǎn)生的或者是由機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的，反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì).包括蛋白質(zhì)、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基因產(chǎn)物等?；颊哐夯蝮w液中腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)，對(duì)腫瘤的輔助診斷、鑒別診斷、療效觀察、病情監(jiān)測(cè)以及預(yù)后的評(píng)價(jià)具有一定的價(jià)值。,（一）腫瘤標(biāo)志物的慨述,1. 腫瘤標(biāo)志物的定義,特異性好,與腫瘤類型 (大小/分期) 有關(guān),靈敏度高，能腫瘤能早期發(fā)現(xiàn)。,具有器官特異性,

7、,,,,,,,監(jiān)測(cè)腫瘤治療效果,監(jiān)測(cè)腫瘤的復(fù)發(fā),理想的腫瘤標(biāo)志物,,,預(yù)測(cè)腫瘤的預(yù)后,體液腫瘤標(biāo)志物的分類和命名尚未完全統(tǒng)一，一般分為：⑴ 胚胎抗原類：如AFP，CEA等，⑵ 糖鏈抗原類：如CA125，CA15-3，CA19-9等。⑶ 激素類：如患甲狀腺髓樣癌時(shí)降鈣素升高，患絨毛膜 細(xì)胞癌時(shí)hCG明顯升高。⑷ 酶和同工酶類：γGT，PAP等。⑸ 蛋白質(zhì)類：β2微球蛋白，鐵蛋白，本周蛋白等⑹ 癌基因產(chǎn)物類如ras基因蛋白，my

8、c基因蛋白，p53抑癌基因蛋白等。,,2. 腫瘤標(biāo)志物的分類,⑴ 腫瘤的大小和腫瘤細(xì)胞的數(shù)目 ⑵ 腫瘤細(xì)胞合成和分泌腫瘤標(biāo)志物的速度 ⑶ 腫瘤組織的血液供應(yīng)好壞 ⑷ 腫瘤細(xì)胞是否有壞死和壞死的程度 ⑸ 腫瘤細(xì)胞的分化程度和腫瘤的分期 ⑹ 腫瘤細(xì)胞是否表達(dá)和合成腫瘤標(biāo)志物 ⑺ 腫瘤標(biāo)志物在體內(nèi)的降解和排泄速度,3. 影響血液和體液中腫瘤標(biāo)志物濃度的因素,4. 腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用,⑴ 高危人群的篩查⑵ 腫瘤的輔助

9、診斷⑶ 腫瘤治療效果的評(píng)價(jià)⑷ 腫瘤復(fù)發(fā)的監(jiān)測(cè)和預(yù)后判斷,1. 胚胎抗原類腫瘤標(biāo)志物,（二）常見腫瘤標(biāo)志物,⑴ 甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）,AFP是胎兒發(fā)育早期合成的一種糖蛋白(α1球蛋白)，分子量70kD，胎兒出生后不久即逐漸消失。參考值：血清AFP <20μg/L,① 原發(fā)性肝癌，77%的患者AFP>300μg/L，但有部分患者AFP始終不升高；② 病毒性肝炎與肝硬化患者，血清中AFP可有不同程

10、度的增高，但一般在300μg/L以下；③ 生殖系統(tǒng)腫瘤和胚胎性腫瘤，如睪丸癌、畸胎瘤等升高；④ 妊娠三個(gè)月后，血清AFP含量開始升高，分娩后三周恢復(fù)正常。若孕婦血清中AFP異常升高，應(yīng)考慮有胎兒神經(jīng)管缺損畸形的可能性。,⑵ 癌胚抗原（carcino-embryonic antigen，CEA）,① 結(jié)腸癌、直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，轉(zhuǎn)移性 惡性腫瘤也有不同程度的陽(yáng)性率；在惡性腫瘤的隨訪， 病情監(jiān)測(cè)，療效評(píng)

11、價(jià)等方面有重要價(jià)值。② 腸道息肉、憩室炎、結(jié)腸炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺 部疾病也可有不同程度的升高；③ 吸煙者中約有33%的人CEA＞5μg/L。,1965年CEA發(fā)現(xiàn)于成人結(jié)腸癌組織中，分子量約為200kD，可溶性糖蛋白，主要存在于成人癌組織以及胎兒的胃腸管組織中，故名癌胚抗原，是一種廣譜腫瘤標(biāo)志物。參考值：血清CEA< 5.0μg/L,2. 糖鏈抗原類腫瘤標(biāo)志物,（1）糖鏈抗原15-3 ( CA 15-3),

12、① 乳腺癌，但在乳腺癌的早期陽(yáng)性率較低約為30%，轉(zhuǎn)移性 乳腺癌陽(yáng)性率可達(dá)80%；② 其他惡性腫瘤，如肺癌，結(jié)腸癌，胰腺癌，卵巢癌，子宮 頸癌，原發(fā)性肝癌等，也有不同程度的陽(yáng)性率；③ 肝臟，胃腸道，肺，乳腺，卵巢等非惡性腫瘤疾病，陽(yáng)性 率一般低于10%。,CA15-3是一種乳腺癌相關(guān)抗原，屬糖蛋白，分子量超過400kD，可用一對(duì)單克隆抗體（MAb115D8和MAbDF3）進(jìn)行雙抗體夾心法來識(shí)別。與CA1

13、5-3同類的多態(tài)性上皮粘蛋白抗原還有MCA，CA27-29，CA549等。參考值：血清CA15-3<28kU/L,,（2）糖鏈抗原125 ( CA 125),CA125是很重要的卵巢癌相關(guān)抗原，1981年Bast發(fā)現(xiàn)。CA125是一種大分子多聚糖蛋白。參考值 ：血清CA 125 <35kU/L,① 卵巢癌，陽(yáng)性率約為61.4%。手術(shù)和化療有效者CA 125水平很快 下降，若有復(fù)發(fā)，CA 125升高可先于臨床癥狀

14、出現(xiàn)之前。② 其他惡性腫瘤，如乳腺癌40%，胰腺癌50%，胃癌47%，肺癌41.4%， 結(jié)腸直腸癌34.2%，其他婦科腫瘤43%。③ 非惡性腫瘤，如子宮內(nèi)膜異位癥，盆腔炎，卵巢囊腫，胰腺炎，肝炎， 肝硬化等疾病也有不同程度升高。④ 妊娠早期，CA 125有升高。,（3）糖鏈抗原19-9 (CA19-9),CA19-9是一種與胰腺癌，膽囊癌，結(jié)腸癌和胃癌相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物，又稱胃腸癌相關(guān)抗原。參考值：血清CA19

15、9 <37 kU/L,① 胰腺癌，膽囊癌，膽管壺腹癌時(shí)，血清CA 19-9水平明顯升高， 陽(yáng)性率約為74.9%，尤其是胰腺癌晚期病人，血清CA 19-9濃度 可達(dá)40萬kU/L，是重要的輔助診斷指標(biāo)； ② 胃癌，陽(yáng)性率約為50%，結(jié)腸癌，陽(yáng)性率約為60%；③ 急性胰腺炎，膽囊炎，膽汁淤積性膽管炎，肝硬化，肝炎等 疾病，CA 19-9也有不同程度的升高，注意與惡性腫瘤的鑒別。,3. 酶類腫瘤標(biāo)志物,⑴ 前

16、列腺特異性抗原 (PSA),參考值：血清 t-PSA 25％,PSA是一種由前列腺上皮細(xì)胞分泌的蛋白酶。在血清中PSA以兩種生化形式存在： 一部分(5%～40%)是以低分子量(33kD)的 游離PSA（f-PSA）形式存在； 大部分(60%～90%)是以PSA和α1–抗糜蛋白酶、 α2-巨球蛋白等結(jié)合的形式存在， 稱復(fù)合PSA(c-PSA)。 總PSA（t-PSA）,

17、包括血清中f-PSA和c-PSA。,,【注意事項(xiàng)】在采集病人的血標(biāo)本前進(jìn)行直腸指診、前列腺按摩，導(dǎo)尿等，將會(huì)導(dǎo)致血清PSA升高，應(yīng)注意避免。,血清PSA升高① 前列腺癌患者升高，但大約25%患者，其PSA水平正常；而大約有50%的良性前列腺疾病患者PSA水平增高。為增加PSA對(duì)前列腺癌 檢測(cè)的敏感性和特異性，可使用PSA年齡特異性參考范圍，PSA密度、PSA速率、f-PSA/t-PSA比值等；② 前列腺肥大，前列腺炎和泌尿生殖系

18、統(tǒng)的疾病，也可見血清PSA水平升高，故當(dāng)PSA在4.0μg/L～10.0μg/L的灰區(qū)時(shí)，須進(jìn)行f-PSA和 f-PSA/t-PSA比值的測(cè)定。,NSE是烯醇化酶的一種同功酶，烯醇化酶同功酶根據(jù)α，β，γ三個(gè)亞基的不同，可分為αα、ββ、γγ、αβ和αγ五種二聚體同功酶。 γγ亞基組成的同功酶屬神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞特有，故命名為神經(jīng)元特異性烯醇化酶， NSE是一種酸性蛋白酶，參與糖酵解。腫癌組織糖酵解作用加強(qiáng)，細(xì)胞增殖

19、周期加快，細(xì)胞內(nèi)的NSE釋放進(jìn)入血液增多，導(dǎo)致此酶在血清內(nèi)含量增高。,參考值：血清NSE<15μg/L,⑵ 神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）,【注意事項(xiàng)】NSE也存在于正常紅細(xì)胞中，標(biāo)本溶血會(huì)影響測(cè)定結(jié)果，因此采血時(shí)要特別注意避免溶血。,血清NSE升高見于① 小細(xì)胞肺癌（SCLC）?？捎糜阼b別診斷，監(jiān)測(cè)小細(xì)胞肺癌放療、化療后的治療效果。② 神經(jīng)母細(xì)胞瘤，患者NSE水平異常增高， 而Wilms瘤則升高不明顯，因此測(cè)定NSE的水平可

20、用于上述疾病的診斷和鑒別診斷。 ③ 神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞腫瘤，如嗜鉻細(xì)胞瘤，胰島細(xì)胞瘤，甲狀腺髓樣癌，黑色素瘤，視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤等血清NSE也可增高。,AFU是一種溶酶體酸性水解酶，以往主要用于遺傳性AFU缺乏引起的巖藻糖貯積病的診斷。Deugnier等（1984）首先發(fā)現(xiàn)原發(fā)性肝癌患者血清中AFU活性升高。參考值 ：血清< 420 μmol/L,⑶ α-L-巖藻糖苷酶測(cè)定（AFU）,,①原發(fā)性肝癌，患者血清中AFU活性明顯升高，AF

21、P陰性的肝癌患者中AFU也可見升高，因此，兩者聯(lián)合檢測(cè)有較好的互補(bǔ)作用。② 其他惡性腫瘤，如肺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、子宮癌等也可有部分病例升高。③ 慢性肝炎、肝硬化患者中部分病例AFU升高，隨病情好轉(zhuǎn)AFU下降，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)有助于與肝癌的鑒別。④ 妊娠期間，AFU升高，分娩后迅速下降。,4. 激素類腫瘤標(biāo)志物,hCG是胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白類激素，是監(jiān)測(cè)早孕的重要指標(biāo)。在異常情況下，惡性腫瘤也可產(chǎn)生hCG。參考值上限為:

22、 5 IU/L,⑴ 人絨毛膜促性腺激素 (hCG),① 滋養(yǎng)層腫瘤和生殖細(xì)胞腫瘤hCG升高，如絨毛膜細(xì)胞癌、 葡萄胎、精原細(xì)胞睪丸癌等 ② 其他腫瘤如乳腺癌、胃腸道癌、肺癌等也可見升高。 ③ 良性疾病如卵巢囊腫、子宮內(nèi)膜異位癥、肝硬化等hCG 也可見增高。,CT是由甲狀腺濾泡旁細(xì)胞即C細(xì)胞分泌的多肽激素，主要生理作用是降低血鈣。參考值＜100 ng/L,⑵ 降鈣素（calcitonin, CT）,①

23、甲狀腺髓樣癌血清降鈣素升高，其他腫瘤如肺癌、 乳腺癌、胰腺癌等也見增高。 ② 腎功能衰竭患者降鈣素常升高。,【注意事項(xiàng)】由于降鈣素在血液中的半壽期短約為 10min，樣本收集后應(yīng)及時(shí)處理，冷凍保存。,5. 蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物,β2M是一種低分子蛋白，人體除成熟紅細(xì)胞和胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞以外，所有的有核細(xì)胞都有β2M。因?yàn)棣?M分子量小，易于由腎小球?yàn)V過，但幾乎全部由近曲小管重吸收，因此正常人血和尿中β2M含量很低。參考值：

24、血清 <2.4mg/L；尿 <320μg/L,⑴ β2-微球蛋白( β2M ),,β2M升高見于:① 惡性腫瘤，慢性淋巴細(xì)胞白血病等。② 腎臟疾?。杭甭阅I盂腎炎，腎小管藥物性損害等③ 腎移植排斥反應(yīng)時(shí)。④ 免疫性疾?。合到y(tǒng)性紅斑性狼瘡，艾滋病等。,【注意事項(xiàng)】尿標(biāo)本采集后，為避免β2M分解，應(yīng)加適當(dāng)?shù)?NaOH緩沖液調(diào)PH至7.0左右，然后置4℃保存，2天內(nèi)測(cè)定。,鐵蛋白是判斷體內(nèi)是否缺鐵的敏感指標(biāo)。 Fer升

25、高還與腫瘤有關(guān)，癌細(xì)胞具有較強(qiáng)合成鐵蛋白的能力，因此也是一種腫瘤標(biāo)志物。 血清參考值：男性 15~200 μg/L 　女性 12~150 μg/L,⑵ 鐵蛋白（ ferritin , Fer),,① 各種惡性腫瘤和白血病可見血清鐵蛋白升高。 ② 各種炎癥感染、急性心肌梗死、反復(fù)輸血等，見鐵蛋白升高。③ 鐵蛋白 <12 μg/L 時(shí)即可診斷為缺鐵。是診斷隱性缺鐵性貧

26、血的可靠指標(biāo)。,,6. 其它常用腫瘤標(biāo)志物,（三）腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)的注意事項(xiàng),1. 標(biāo)本采集: 各種物理檢查對(duì)TM檢測(cè)的影響藥物對(duì)TM檢測(cè)的影響標(biāo)本保存對(duì)TM檢測(cè)的影響溶血標(biāo)本對(duì)TM檢測(cè)的影響 酶類和激素類腫瘤標(biāo)志物的特點(diǎn),2. 檢測(cè)方法和試劑： 方法學(xué)的差異 試劑盒的差異 測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)化的問題 因此，在工作中要盡量使用同一種方法，同一種儀器和同一廠家的試劑盒進(jìn)行測(cè)定。,,3. TM檢測(cè)的干擾因素 ⑴ 攜帶污染

27、(carry-over)?、啤般^狀效應(yīng)”（hook effect） ⑶ 嗜異性抗體：可導(dǎo)致在無抗原的情況下，出現(xiàn)腫瘤 標(biāo)志物濃度增高的假象。嗜異性抗體可出現(xiàn)在曾被 鼠或?qū)櫸镆н^的人，以及使用過動(dòng)物免疫劑（如單 克隆抗體）治療過的人。,一種腫瘤可分泌多種腫瘤標(biāo)志物，而不同的腫瘤或同種腫瘤的不同組織類型可有相同的腫瘤標(biāo)志物。因此，單獨(dú)檢測(cè)一 種腫瘤標(biāo)志物，可能會(huì)因?yàn)闇y(cè)定方法的敏感性不夠而出現(xiàn)假陰性，聯(lián)合

28、檢測(cè)多種腫瘤標(biāo)志物有利于提高檢出的陽(yáng)性率。為此，選擇一些特異性較高，可以互補(bǔ)的腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合測(cè)定，對(duì)提高腫瘤的檢出率是有價(jià)值的。常用腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合使用。,（四）腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合應(yīng)用,,,常用腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的臨床應(yīng)用,腫瘤 首選標(biāo)志物 補(bǔ)充標(biāo)志物,肺癌 NSE、CYFRA21-1 CEA、TPA、SCC、ACTH、降鈣素肝癌 AF

29、P AFU、γGT、CEA、ALP乳腺癌 CA15-3、CA549 CEA、hCG、降鈣素、鐵蛋白 胃癌 CA72-4 CEA、CA19-9、CA50前列腺癌 PSA

30、 f-PSA、c-PSA、PAP結(jié)腸直腸癌 CEA CA19-9、CA50 胰腺癌 CA19-9 CA50、CEA、CA125 卵巢癌 CA125

31、 CEA、hCG、CA72-4 睪丸腫瘤 AFP、hCG宮頸癌 SCC CEA、CA125、TPA 膀胱癌 無 TPA、CEA

32、 骨髓瘤 β2-M、本周蛋白,,敏感性和特異性常常是一對(duì)矛盾，提高了敏感性，降低了特異性，也就是說提高了腫瘤的檢出率，同時(shí)提高了腫瘤的假陽(yáng)性率；反之，提高了特異性，降低了敏感性，即提高了腫瘤診斷的準(zhǔn)確性，降低了腫瘤的檢出率（漏診）。我們至今尚未找到一種完美的聯(lián)合，值得我們?cè)诠ぷ髦腥ふ摇?腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合應(yīng)用,腫瘤的發(fā)生與機(jī)體的免疫功能狀態(tài)，尤其是細(xì)胞免疫狀態(tài)密切相關(guān)。腫瘤患者的免疫功能測(cè)定對(duì)了解病情、評(píng)

33、價(jià)療效、判斷腫瘤的發(fā)展及預(yù)后有重要價(jià)值。,判斷機(jī)體免疫功能狀態(tài)的常用指標(biāo)，包括T細(xì)胞及其亞群測(cè)定，T細(xì)胞增殖試驗(yàn)，巨噬細(xì)胞功能測(cè)定，NK細(xì)胞活性測(cè)定，T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(LMC)測(cè)定以及血清中抗體、補(bǔ)體、某些細(xì)胞因子，如IL-2、TNF、IFN等測(cè)定,二、 腫瘤患者免疫功能狀態(tài) 的檢測(cè)及臨床意義,腫瘤抗原是指在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中新出現(xiàn)的或過度表達(dá)的抗原物質(zhì)。 機(jī)體的抗腫瘤免疫學(xué)機(jī)制十分復(fù)雜，包括體液免疫機(jī)制和細(xì)胞免疫